P53基因是目前研究最廣泛的腫瘤抑制基因之一，其表達(dá)產(chǎn)物p53蛋白能促使癌細(xì)胞凋亡，從而防止癌變和腫瘤生長，另外還具有幫助細(xì)胞基因修復(fù)缺陷的功能，對人體起到保護(hù)作用。但p53基因經(jīng)常發(fā)生變異，在約50%的人癌細(xì)胞中p53因?yàn)樽儺惗鴮?dǎo)致p53蛋白失活。而其他蛋白與p53的相互作用，也是導(dǎo)致其正常生物功能喪失的主要原因。

       MDM2（murine double mimute 2，雙微體2）是p53的一個最重要的抑制因子，當(dāng)兩者結(jié)合的時候，會使p53蛋白降解， 活性降低，抑癌作用減弱。以MDM2-p53為靶點(diǎn)設(shè)計(jì)開發(fā)全新機(jī)制的抗腫瘤藥物，是當(dāng)下全球腫瘤藥物研發(fā)領(lǐng)域熱點(diǎn)與重點(diǎn)之一。然而由于MDM2-p53蛋白相互作用的特殊性給小分子抑制劑的開發(fā)帶來相當(dāng)大的困難，導(dǎo)致全球該領(lǐng)域的在研藥物屈指可數(shù)。

       3月26日，亞盛醫(yī)藥帶來新突破，公司在研新藥MDM2-p53抑制劑APG-115的臨床前研究成果在國際著名期刊《自然免疫學(xué)》（Nature Immunology）發(fā)表，揭示了鼠雙微體同源基因2（MDM2）在CD8+T細(xì)胞介導(dǎo)免疫中的作用。

       在本研究未開展前，MDM2-p53軸是否影響CD8+（細(xì)胞**或癌細(xì)胞殺滅）T細(xì)胞介導(dǎo)的抗腫瘤免疫尚不得而知。通過系列生化、遺傳和功能研究，本研究已證實(shí)MDM2在維持T細(xì)胞穩(wěn)定性、存活和抗腫瘤免疫中發(fā)揮著關(guān)鍵生物學(xué)作用。這一發(fā)現(xiàn)可為靶向MDM2的藥物如APG-115和腫瘤免疫治療間的協(xié)同作用奠定一定的生物學(xué)基礎(chǔ)。

       APG-115是新一代口服活性小分子抑制劑，可通過調(diào)節(jié)野生型p53和/或MDM2擴(kuò)增，進(jìn)而激活p53介導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞凋亡進(jìn)程。它是首 個在中國進(jìn)入臨床階段的MDM2-p53抑制劑，已在中國和美國展開多項(xiàng)治療實(shí)體瘤及血液腫瘤的1b/2期臨床研究。

       在有關(guān)MDM2-p53 相互作用抑制劑的早期研究中，報道最多的是合成肽類以及真菌環(huán)肽氯氟菌素。但由于肽類化合物在體內(nèi)不穩(wěn)定以及透膜能力不強(qiáng)等因素，小分子抑制劑應(yīng)運(yùn)而生，與肽類抑制劑相比，MDM2-p53 相互作用的小分子抑制劑具有分子量低、特異性高、便于口服的特點(diǎn)，得到了很多研究者的青睞。經(jīng)過多年的努力，人們已經(jīng)成功設(shè)計(jì)和開發(fā)出一系列結(jié)構(gòu)獨(dú)特、高效的非肽類MDM2-p53 小分子抑制劑。迄今為止，有多種MDM2-p53 小分子抑制劑進(jìn)入臨床。

       下面將詳細(xì)討論這些小分子抑制劑的臨床研究進(jìn)展及發(fā)展前景。

       1.RG7112

       RG7112是臨床上第一個設(shè)計(jì)用來占據(jù)MDM2 的p53 結(jié)合位點(diǎn)的小分子MDM2 抑制劑，它可口服，可透過血腦屏障。為了改善順式咪唑啉類抑制劑的生物學(xué)和藥代動力學(xué)性質(zhì)，在nutlin-3a 基礎(chǔ)上羅氏公司經(jīng)過不斷優(yōu)化得到的。它與MDM2 結(jié)合，從而抑制p53 和MDM2 的相互作用。這阻止了p53 蛋白酶體的降解，進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞中腫瘤抑制蛋白p53 的穩(wěn)定和增加。該化合物在體外對高表達(dá)MDM2 蛋白的SJSA-1 骨肉瘤細(xì)胞具有生長抑制和殺傷作用。目前，RG7112 進(jìn)行了多種臨床實(shí)驗(yàn)，主要是包括慢性髓細(xì)胞白血病、急性髓性白血病、實(shí)體瘤、血液瘤在內(nèi)的Ⅰ期臨床試驗(yàn)。

       2.AMG232

       AMG232是一種有效、選擇性高、可口服的 MDM2-p53 相互作用的哌 啶酮類抑制劑，IC50 值為0.6 nmol·L-1，與MDM2 結(jié)合的 Kd 為 0.045nmol·L-1。研究表明，AMG232 對p53 野生型細(xì)胞顯示出比RG7112 更高的選擇性。體外實(shí)驗(yàn)表明AMG232 在3 種p53 野生腫瘤細(xì)胞系模型中(SJSA-1、HCT116和ACHN)，均可誘導(dǎo)p53 信號轉(zhuǎn)導(dǎo)并抑制腫瘤細(xì)胞增殖。目前，AMG232 正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)，以評估AMG232 在晚期實(shí)體瘤中的臨床潛力。其中AMG232 用于評估晚期實(shí)體瘤或多發(fā)性骨髓瘤以及轉(zhuǎn)移性黑色素瘤的臨床試驗(yàn)已經(jīng)完成了Ⅰ期臨床，正在進(jìn)行漿細(xì)胞瘤、急性髓細(xì)胞白血病、膠質(zhì)母細(xì)胞瘤等的Ⅰ期臨床。

       3.SAR405838

       SAR405838是一種高效、選擇性的螺氧吲哚類MDM2 抑制劑，表現(xiàn)出良好的MDM2 結(jié)合親和力和生長抑制活性。在SJSA-1 模型中，SAR405838能有效地抑制腫瘤細(xì)胞株的生長；對p53 突變或缺失的癌細(xì)胞株表現(xiàn)出高選擇性。SAR405838目前正在進(jìn)行惡性腫瘤的Ⅰ期臨床試驗(yàn)。

       4.DS-3032

       DS-3032又稱mliademetan，是MDM2 的一種新型、特異性、可口服的小分子抑制劑 ，它破壞了腫瘤細(xì)胞中MDM2-p53 的相互作用，可用于急性髓性白血病 (AML) 的研究，正在被開發(fā)為一種基于p53 再激活機(jī)制的癌癥治療藥物。

       5.RG7388

       吡咯烷衍生物RG7388，被稱為idasanutlin，是羅氏開發(fā)的全球首 個強(qiáng)效口服MDM2 蛋白抑制劑，RG7388 具有較好的活性和選擇性，能有效激活p53 途徑，導(dǎo)致野生型p53 表達(dá)，激活細(xì)胞周期阻滯或凋亡，并在裸鼠骨肉瘤移植瘤實(shí)驗(yàn)中抑制腫瘤增殖。RG7388 目前共開展了15 項(xiàng)臨床研究，其中全球最高研發(fā)狀態(tài)為聯(lián)合阿糖胞苷治療復(fù)發(fā)或難治性急性髓細(xì)胞白血?。ˋML）的III 期臨床（NCT02545283），但根據(jù)中期分析的療效結(jié)果，該研究已中止。

       以MDM2-p53 為靶點(diǎn)設(shè)計(jì)開發(fā)全新機(jī)制的抗腫瘤藥物，是當(dāng)下全球腫瘤藥物研發(fā)領(lǐng)域熱點(diǎn)與重點(diǎn)之一。然而MDM2-p53 蛋白相互作用的特殊性給小分子抑制劑的開發(fā)帶來相當(dāng)大的困難，導(dǎo)致全球該領(lǐng)域的在研藥物屈指可數(shù)，目前，大部分小分子抑制劑處于研發(fā)階段，正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)，但也有部分化合物由于種種原因終止了試驗(yàn)。而國內(nèi)在該領(lǐng)域的在研藥物除APG115 外尚未見其他報道。為此深入研究MDM2-p53 的作用機(jī)制，優(yōu)化靶向MDM2-p53 的小分子抑制劑，有利于推進(jìn)靶向MDM2-p53 小分子在臨床研究中的應(yīng)用，具有很好的開發(fā)前景。

       參考來源：

       1.Tafvizi, Anahita, et al. A single-molecule characterization of p53 search on DNA.Proceedings of the National Academy of Sciences 108.2 (2011): 563-568.

       2.Bykov, Vladimir JN, et al. Targeting mutant p53 for efficient cancer therapy.Nature Reviews Cancer 18.2 (2018): 89.

       3.Skalniak, Lukasz, et al.Prolonged idasanutlin (RG7388) treatment leads to the generation of p53-mutated cells.Cancers 10.11 (2018): 396.

       4.Chang, Yong S., et al.Stapled α- helical peptide drug development: A potent dual inhibitor of MDM2 and MDMX for p53-dependent cancer therapy.Proceedings of the National Academy of Sciences 110.36 (2013): E3445-E3454.

       5. Clinical Benefit in Response to PalbociclibTreatment in Refractory Uterine Leiomyosarcomas with a Common CDKN2A AlterationThe oncologist，2017.