原來小草從來不孤單，風把它吹向朋友懷抱，從春到夏，從秋到冬，不曾被命運擊倒。你可曾聆聽心跳，屬于你生命的訊號，它總是和時間賽跑，每一個朝朝暮暮，你看陰霾正在被趕跑，陽光穿透云層來照耀，無數(shù)人勇敢微笑，堅信明天會更好。

       —— 選自歌曲 《草》

       這首《草》是由央視Boys（康輝、撒貝寧、朱廣權、小尼）、陳果毅等演唱的歌曲，在去年央視一檔電視節(jié)目中，感動了無數(shù)人。

       陳果毅，這位被稱為輪椅男孩的中國童星，2010年出生于中國廣州，擅長配音、唱歌、圍棋，在16個月大時被確診得了“脊髓性肌萎縮癥”（SMA）;自2018年參加《音樂大師課》節(jié)目海選，在全國6000多名孩子中脫穎而出，最終奪得廣東賽區(qū)第一，全國賽區(qū)第十二名。2019年正式成為廣東電視臺《最美童聲》的簽約歌手。他的勵志人生為中國數(shù)萬名SMA患者和2000多萬名罕見病患者及他們的家庭帶來對生活的愛與勇氣。本篇文章中，我們走進這一罕見?。杭顾栊约∥s癥。

       圖1 SMA的時間軸

       自Werdnig 和 Hofmann在1891年和1893年首次報道脊髓肌萎縮癥患者以來，SMA這種罕見病的現(xiàn)狀已經(jīng)發(fā)生了相當大的變化。

       最早時嚴重的嬰幼兒患病也稱為Werdnig-Hofmann病。20世紀50年代，Wolfhart, Fez和Eliasson描述了一種較溫和的SMA形式：輕度SMA患者可保持站立和行走能力，生存期延長。SMA的主要病理定義為前角變性和嚴重肌肉萎縮。此外，強調了對稱的、以近端為主的虛弱的關鍵臨床特征，主要影響軸、肋間和球部肌肉組織。

       機制研究表明，這種疾病是由體內的突變引起的，正常的SMN1基因編碼運動神經(jīng)元生存蛋白（SMN蛋白），這是神經(jīng)和運動功能所必需的。突變的SMN1基因使體內不能產(chǎn)生正常的SMN蛋白，導致骨骼肌萎縮，進一步影響SMA患者的運動、吞咽和呼吸能力。相關基因SMN2也編碼SMN蛋白，但一個同義點突變導致pre-mRNA剪切，跳過第7外顯子的概率約為90%，導致生成的轉錄產(chǎn)物易降解，大部分為不穩(wěn)定的“截短蛋白”。（見圖2）

       圖2 人體SMN2和SMN1基因示意圖

       SMN2拷貝數(shù)與SMA的嚴重程度常呈負相關，能夠在一定程度上預測SMA的表型，大部分SMA 1型有1或 2個拷貝，2型通常有3個拷貝，3型常有3或4個拷貝，0拷貝出現(xiàn)在0型。

       臨床上將SMA分為4種類型。

       ① Ⅰ型，最常見的類型，小于6個月時發(fā)病，表現(xiàn)為不能獨坐，且由于嚴重肌張力減退及對稱性肌無力導致無法支撐自己頭部，通常于2歲內死于吸入性肺炎，為嚴重型。近年來，隨著呼吸系統(tǒng)疾病管理體系及支持療法的完善，Ⅰ型患者的平均存活時間有了顯著提升，但尚無從本質上改善患者的肌力。

       ② Ⅱ型，6～18個月時發(fā)病，表現(xiàn)為能獨坐，但不能獨立行走，伴有關節(jié)攣縮和脊柱后突，隨著病情進展需要呼吸機維持呼吸，?？纱婊钪?歲以后。

       ③ Ⅲ型，＞18個月時發(fā)病，能獨坐和獨立行走，生存基本不受影響，可選擇輪椅或者行走，伴有脊柱側突和骨質疏松，為輕型,?？纱婊钪脸扇似?。

       ④ Ⅳ型，＞30歲發(fā)病，能獨坐和獨立行走，無消化系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)癥狀，為成人型。除此之外還有一種不常見的類型，發(fā)生在宮內，表現(xiàn)為胎動減少，如不采取治療措施，常于1歲內死亡，為最嚴重的一種類型，稱為SMA 0型。

       圖3 脊髓性肌萎縮癥（SMA）的分類

       對于SMA的治療手段，已經(jīng)有很多綜述報道過，筆者根據(jù)2020年的Journal of Neuromuscular Diseases 7 (2020) 1–13等幾篇綜述來簡單的介紹一下。

       雖然SMA是一種單基因神經(jīng)肌肉疾病，但其表型非常復雜，通常被認為是一種全身性疾病，因此，照顧SMA患者需要呼吸、營養(yǎng)和胃腸病學、骨科和社會心理問題的跨學科管理。一般的治療可參考2007年的關于SMA護理標準的第一份共識聲明中。然而，護理標準的執(zhí)行是高度可變的，并受到文化觀點、社會經(jīng)濟因素和區(qū)域資源可用性的影響。

       在過去的幾十年里，一些化合物已經(jīng)在隨機對照試驗中進行了研究，包括高乙?；瘎绫焖峄虮蕉∷?，合成代謝劑，如沙丁胺醇，增加肌肉力量和功能的方法、促甲狀腺激素釋放激素或生長激素和神經(jīng)保護劑如加巴噴丁、利魯唑和奧列索肟。盡管主要終點的結果是負面的，但這些研究驗證了結果，并獲得了有關試驗設計和患者招募可行性的關鍵信息。實際的治療可以細分為SMN2的剪接修飾、SMN1基因替代療法或促進肌肉生長的治療。

       圖4總結了以下部分討論的治療方法，并說明了各自的分子機制的作用;圖6顯示了相關治療藥物和臨床藥物的發(fā)展現(xiàn)狀。

       圖4 SMA的治療方法涉及分子作用機制

       目前，關于脊髓性肌萎縮癥治療策略的研究熱點主要集中于以下幾個方面。

       （1）作用于SMN2 基因轉錄剪接過程：通過反義寡核苷酸（ASO）或其他口服小分子藥物（RG7916、LMI070）調節(jié)SMN2基因轉錄和剪接過程，促進完整的全長SMN蛋白合成.

       （2）SMN1基因替代療法：由腺相關病毒（AAV）介導的SMN1基因替代療法，以糾正SMN1基因缺陷。

       （3）其他治療方法：神經(jīng)保護藥物、靶點作用于肌肉的小分子藥物、干細胞移植治療等；

       SMN2的剪接修飾：2016年12月Spinraza成為首 個FDA批準用于SMA治療的藥物(曾用名IONIS-SMNRX，商品名Spinraza)，2019年2月在國內上市（即諾西那生鈉注射液，國內一針70萬，2021年后調整價格至55萬/針）。它是一種反義寡核苷酸(ASO)，ASO是人工合成的短鏈核酸序列，長度為 8 ~ 50 bp，可以選擇性地與信使RNA（mRNA）結合，從而影響 RNA 翻譯啟動或改變外顯子剪接。Spinraza是一種經(jīng)修飾的ASO，可特異性地識別SMN2基因內含子7剪接沉默子N1序列（ISS-N1），通過阻斷負性調控位點通路以調節(jié)SMN2 pre-mRNA 轉錄本的剪接，達到增加 SMN2基因外顯子7的翻譯剪接目的，上調SMN蛋白的表達。體外實驗和動物實驗均已證實，Spinraza 可上調全長 SMN 蛋白的表達水平。由于反義寡核苷酸不易透過血腦屏障，因此僅能鞘內給藥；在美國這種療法每次注射花費12.5萬美元，且必須終生進行鞘內注射；藥物治療開始于2個月的4次負荷劑量，每次需要維持注射4個月。按每次注射125 000美元計算，僅第一年建議的6-7次注射總額為750 000至875 000美元，不包括住院費用。Spinraza被譽為“非常有效”，它的兩名發(fā)明者獲得了300萬美元的“突破獎”。

       小分子剪接修飾劑Evrysdi( risdiplam)：FDA于2020年8月7日批準基因泰克公司的Evrysdi用于2月齡及以上的兒童治療脊髓性肌萎縮癥。Evrysdi 呈液體狀態(tài)，通過口服或鼻飼管給藥，每日1次，是首 個可在家使用的SMA療法。FDA 在審批Evrysdi時采用了快速審批通道和優(yōu)先評審審批程序,并授予其孤兒藥地位，該藥在美國的定價需參考患者體重，年治療費用約237萬元人民幣。2021年06月17日在國內上市，8月羅氏利司撲蘭口服溶液用散（艾滿欣）獲批，適用于2月齡及以上患者的SMA，60mg/瓶的零售價為6.38萬元。臨床試驗數(shù)據(jù)表明對嬰兒型脊髓性肌萎縮癥( infantile-onset SMA) 和遲發(fā)型脊髓性肌萎縮癥( later-onset SMA) 均有效。從圖4的分子作用機制中可以看到，小分子和ASO雖然都可以作為剪接修飾劑，但是作用的位點是不一樣的，ASO（Spinraza）結合在SMN2外顯子7下游的單鏈pre-mRNA上，小分子作用于上游。關于該小分子剪接修飾劑的發(fā)現(xiàn)和改造過程可以參考2018年的一篇JMC（doi: 10.1021/acs.jmedchem.8b00741.）。risdiplam是一種完全符合Lipinski?s rule of 5的小分子藥物，具有優(yōu)良的理化性質；最初篩出的香豆素骨架在Ames試驗中呈陽性，且香豆素和異香豆素在血漿蛋白質中都是不穩(wěn)定的。經(jīng)過骨架躍遷和大量的SAR研究得到的化合物risdiplam能夠入腦，且具有良好的口服生物利用度。（圖5）

       圖5 小分子剪接劑 risdiplam

       SMN1基因替代療法：基因替代療法是通過病毒載體將外源性基因導入宿主體內，使外源性基因在宿主細胞內表達目的蛋白。腺相關病毒載體是一種小型非致病性病毒，靶向運動神經(jīng)元和星形膠質細胞，從而有效傳染整個中樞神經(jīng)系統(tǒng)，其中，自身互補腺相關病毒9（scAAV9）可以透過血腦屏障，通過靜脈注射或鞘內注射方式導入宿主體內，且不整合至宿主基因組。目前尚無腺相關病毒載體致人類疾病的文獻報道，故安全性較高。理論上講，由 scAAV9 介導的SMN1 基因替代療法是治療脊髓性肌萎縮癥最合理、最有效的方法之一，其優(yōu)勢在于僅通過單次靜脈注射即可獲得臨床療效。諾華的Zolgensma就是這樣的一種藥物，它將拷貝的SMN1基因傳遞到肌肉細胞，使得能夠產(chǎn)生SMN蛋白。SMN1的缺陷基因沒有被移除，可能會繼續(xù)轉錄，產(chǎn)生未知的下游效應。Zolgensma能夠穿過血腦屏障，避免了鞘內注射。在美國Zolgensma是目前市場上價格最高的一次性治療藥物，每針212.5萬美元。Zolgensma被譽為“救命藥”和“治愈藥”，F(xiàn)DA在其開發(fā)早期就將其列為突破性療法。然而，這么昂貴的價格讓人忘記了FDA文件中顯示的這些好處。

       圖6 代表性的治療SMA的藥物（RG7916已上市）和臨床在研藥物

       以上是國際上獲批的三種SMA的修正治療藥物。此外還可以通過其他途徑保護運動神經(jīng)元和下游肌肉功能，維持患者運動功能。肌肉激活藥物和神經(jīng)保護等藥物不依賴SMN蛋白表達水平的提高，可與上述特異性治療方案聯(lián)合應用，發(fā)揮一定輔助作用。例如肌肉激活藥物Reldesemtiv（CK-2127107），目前SMA適應癥處于二期臨床；神經(jīng)保護藥物Olesoxime（TRO19622）是膽固醇類化合物，目前SMA適應癥臨床狀態(tài)顯示Discontinued;此外還有一些臨床在研的治療SMA的藥物見圖6。

       期待更多的、價格適中的藥物獲批，給SMA患者更多的選擇。

       專欄作家：星星狐

       藥物化學背景，曾從事靶點調研、專利分析與突破、改良新藥方面的工作；現(xiàn)專注于創(chuàng)新藥分子設計；熱愛醫(yī)藥行業(yè)，愿與各位同行互相學習、進步，見證創(chuàng)新藥最好的時代。

       參考文獻：

       1，David C. Schorling et al. Advances in Treatment of Spinal Muscular Atrophy-New Phenotypes,New Challenges, New Implications for Care; Journal of Neuromuscular Diseases 7 (2020) 1–13.

       2，Jonathan J. Darrow; Monica Sharmaet al.Efficacy and costs of spinal muscular atrophy drugs, Sci. Transl. Med. 12, 9648 (2020).

       3，Vamshi K. Rao et al；Gene Therapy for Spinal Muscular Atrophy: An Emerging Treatment Option for a Devastating Disease；J Manag Care Spec Pharm. 2018;24(12-a):S3-S16。

       4，Sithara Ramdas et al；New treatments in spinal muscular atrophy: an overview of currently available data; DOI: 10.1080/14656566.2019.1704732。